狗狗cpv试纸怎么测?

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现在犬瘟热病毒检测方法有:血清学试验、PCR和核酸探针三种,其中以PCR最为敏感,目前已成为诊断该病的金标准[1] 。

由于血清学检验的检出率较低且存在假阳性现象,所以一般不用做初检;而PCRPNA探针虽然灵敏度高,但技术较为复杂且成本较高,难以在中小型实验室推广使用。因此,临床上最可靠有效的办法还是采用PCR法进行检测,但是这一方法的特异性不高,在犬科动物中普遍存在该病毒的抗体,所以还需要进一步对PCR产物进行克隆和分析才可以得到可靠的结论[25] 。本实验根据GenBank上公布的CSFV标准毒株GP07株的ORF2基因序列设计出一套引物来扩增该基因上的460bp片段,并以此为模板构建了重组质粒pMD19-TM,利用PCR法成功检测出了CSFV感染的犬粪便样本。

本文所设计的引物可以用于临床样本中犬细小病毒的快速筛查。为临床及预防工作提供了一定的参考依据!

1.材料与方法

1.1.试剂与仪器

1.1.1. 主要试剂

TRIzol(Invitrogen公司);AMV反转录酶、RNaseH(Promega公司); dNTPs、Oligo(dT)18(宝生物工程(大连)有限公司);DL2000DNAMarker(上海华舜生物工程有限公司);Taq DNA聚合酶(北京索莱宝科技有限公司);pMD19-T载体(TaKaRa公司);dNTPS(上海生工生物工程技术服务有限公司):PCR纯化回收试剂盒(上海英骏生物技术有限公司);E·coliDH5α菌株由本实验室保存。

1.1.2. 主要仪器设备

电子天平(上海梅特勒-托利多仪器有限公司);PCR仪(美国BioRad公司);高速冷冻离心机(长沙湘仪离心机仪器有限公司);凝胶成像系统(北京六一医疗器械厂)。

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1、用消毒过的针头(注意不要刺破手指,以免感染)吸取血液滴入检测卡中; 2、把检测卡在35℃以下的水里浸泡2分钟; 3、将带有血样的检测卡放入试剂盒内,盖上盖子摇匀,等待反应的完成。 结果判断 1、未受感染的阳性犬在20分钟左右会显示弱阳性的信号,即C线比T线稍深或颜色略浅;而受感染的动物则会在10分钟左右出现非常明显的阳性和强阳性反应;

2、使用已稀释的多克隆抗体血清的狗,可同时作中和试验来确诊,也可用来诊断其他传染病,例如细小病毒病和传染性肝炎等。 小贴士 中和性抗体的效价越高,表明抗体水平也高;反之,效力就低,说明其体内没有足够的保护性抗体存在。所以,如果测试结果显示为弱阳性,那最好还是注射疫苗吧!

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